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采用HILIC色譜柱TSKgel Amide-80測定甜菜堿的含量
甜菜堿(Betaine)是一種生物堿,天然存在于很多動植物體內。其分子內有3個有效甲基,作為甲基提供者參與合成蛋氨酸,在營養物質的代謝中起著十分重要的作用。甜菜堿在醫藥、化妝品、食品發酵和飼料工業等多個行業中都有廣泛的應用。
溶液配制
樣品稀釋液:75% 乙腈-水溶液。
用樣品稀釋液將甜菜堿儲備液 (2 mg/mL) 序列稀釋得到濃度為0 μg/mL,20 μg/mL,50 μg/mL,100 μg/mL,200 μg/mL,500 μg/mL,1000 μg/mL,2000 μg/mL的標準工作液,依次由低到高進樣檢測。
分析條件
色譜柱:TSKgel Amide-80 (3μm, 4.6mmI.D. ×15cm)
流動相:乙腈-水,梯度洗脫
流速:1.0 mL/min
柱溫:30℃
紫外檢測器:205 nm
進樣量:10 μL
流動相梯度洗脫程序見下表:
時間 (min) |
水 (%) |
乙腈 (%) |
0 |
5 |
95 |
2 |
10 |
90 |
3 |
30 |
70 |
4~9 |
50 |
50 |
10~15 |
5 |
95 |
分析結果
圖2. 甜菜堿標準曲線(標準方差=0.99997)
本應用參照行業標準NY/T 2947-2016,按高效液相色譜法,采用親水作用多孔硅膠色譜柱TSKgel Amide-80 (3 μm, 4.6 mm I.D. × 15 cm) 來測定甜菜堿的含量。分析結果表明,該色譜柱完全滿足標準中對甜菜堿分離檢測的要求。
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